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酶底物法檢測糞大腸菌群流程介紹

來源:西安海研生物科技公司         發(fā)布時(shí)間:2020-11-23

糞大腸菌群是一個(gè)公共衛(wèi)生問題重點(diǎn)關(guān)注的對象,受糞便污染的水、食品、化妝品和土壤等物質(zhì)均含有大量的這類菌群。若檢出糞大腸菌群即表明已被糞便污染。所以對這種菌群的檢測非常有必要,檢測方法有很對,今天給大家分享的是酶底物法檢測糞大腸菌群

程控定量封口機(jī)

1、取100ml樣品或是稀釋樣品與滅菌后的三角瓶, 再加入2.7克+-0.5克培養(yǎng)基粉末, 在充分?jǐn)嚢杌靹? 等完全溶解, 在將其全部倒入97孔定量盤內(nèi), 以手扶平97孔定量盤背面, 趕出孔內(nèi)氣泡, 然后, 用程控定量封口機(jī)封口。

2、培養(yǎng)測定糞大腸菌群時(shí), 將封口后的97孔定量盤, 放入恒溫培養(yǎng)箱中, 在44.5攝氏度+-0.5攝氏度下, 培養(yǎng)24小時(shí)。

3、 陽性與陰性對照
將糞大腸菌群標(biāo)準(zhǔn)菌株制成300-3000個(gè)/ml的菌懸液, 將菌懸液按接種和培養(yǎng)要求操作, 陽性菌株應(yīng)呈現(xiàn)陽性反應(yīng);陰性菌株應(yīng)呈現(xiàn)陰性反應(yīng);否則, 結(jié)果無效, 實(shí)驗(yàn)失敗, 重新測定。

4、結(jié)果判讀及計(jì)數(shù)和有效位數(shù)的要求

將培養(yǎng)24小時(shí)的97孔定量盤進(jìn)行結(jié)果讀數(shù), 樣品出現(xiàn)變黃色判斷為糞大腸菌群陽性。測定結(jié)果保留2位有效數(shù)字。

5、結(jié)果計(jì)算與表示
從97孔定量盤法MPN表中查的每100ml水樣中糞大腸菌群的MPN值, 在根據(jù)樣品稀釋度不同, 按照公式換算樣品中糞大腸菌群濃度。

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